公司介绍

杭州谱萤生物科技有限公司位于浙江省杭州市，是一家专注于生物科技研发与生产的高新技术企业。

公司主要提供基因测序试剂与工具、荧光标记与染料产品、医药中间体原料、多肽与蛋白质合成试剂、核酸纯化与qPCR试剂、色谱分析试剂及实验室设备。

谱萤生物致力于为全球生物医药、科研机构和实验室提供高质量的创新产品和定制化技术解决方案，帮助客户在基因研究、药物开发和分子诊断等领域取得突破。

产品名称：dsDNA BR (Broad Range) Assay Kit。宽范围

存储条件：避光、2-8°C保存（推荐 PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 于 -30 ~ -15℃ 长期存放）

仅供科研使用。不可用于诊断程序。

产品概述

PrecisionNA dsDNA BR (Broad Range) Assay Kit 是一种简便、灵敏、精确的双链 DNA (dsDNA) 荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含荧光检测试剂、缓冲液及 dsDNA 标准品。该试剂盒对 dsDNA 样本在 4 - 2,000 ng 区间具有优秀的线性关系，可以对浓度为 0.2 - 2,000 ng/μl 的样本进行精确定量。该试剂盒对 dsDNA 的选择性高于 RNA，对一些常规的污染物，如盐、游离的核苷酸、蛋白质、溶剂、去污剂等都具有良好的耐受性。本产品操作简单，在室温下即可进行，使用前先将荧光检测试剂用缓冲液稀释成工作液，然后加入待测 dsDNA 样品，即可使用 Qubit 荧光仪进行检测。

注意事项

1. 荧光染料存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2. 标准品及样本在使用前请先颠倒混匀，避免吸取不均导致结果偏差。

3. 为保证定量结果的精确，请使用校准后的移液器进行操作。

4. 请在室温下进行定量检测。使用前，将试剂盒中的各组分平衡至室温。实验过程中，请勿长时间用手握住检测的 PCR 管，避免结果偏差。

5. 请务必在样本加入后 3 h 内且避光条件下完成所有样本的检测，避免荧光淬灭导致结果偏差。

实验原理与流程概要

Fig 1. PrecisionNA dsDNA BR Assay Kit操作流程图

• PrecisionNA Reagent、PrecisionNA Buffer按1:200稀释得到Working Solution。

  
  

• PrecisionNA Standard #1、PrecisionNA      Standard #2各取10μl，最终体积为200μl。

  
  

• dsDNA Samples取1 - 20μl，加入1 - 20μl及180 - 199μl相关液体，最终体积为200μl。

实验流程

以下步骤适用于Qubit荧光仪：

1. 使用前，将试剂盒中各组分平衡至室温。

2. 取足够数量的0.5 ml PCR管用于样本和标准品的检测。

• 仅可使用0.5 ml PCR Tubes。

• 在每支PCR管盖上进行标注。请勿在PCR管侧壁上进行标注，以免影响荧光信号的采集。

• 配制检测工作液。取试剂中PrecisionNA dsDNA BR Reagent，用PrecisionNA      dsDNA BR Buffer按照1:200的比例进行稀释，配制成检测工作液，现配现用。禁止用玻璃容器配制检测工作液。

• 应准备足量的检测工作液。例如有7个待检测的DNA样本，加上两个标准品，则需准备2ml的检测工作液，取10μl的PrecisionNA dsDNA BR Reagent加入到1,990μl的PrecisionNA dsDNA BR Buffer，涡旋混匀，备用。

• 配制检测标准品。取190μl检测工作液至标准品PCR管中，分别加入10μl Standard #1和Standard #2至相应的标准品PCR管中。

• 制备检测样品。取180 - 199μl检测工作液至检测PCR管中，分别加入1 - 20μl待测dsDNA样品，使得每个检测样品终体积为200μl。

• 若要添加1 - 2μl样品，请使用2μl移液器以获得最佳效果。

• 涡旋振荡2 - 3 sec，离心收集液体到管底部，尽量避免产生气泡。

• 将所有检测PCR管置于室温环境下避光孵育2 min。按照Qubit荧光仪的操作说明，选择dsDNA Broad Range程序测定浓度。